Beckman細(xì)胞培養(yǎng)試劑在類器官與3D細(xì)胞模型構(gòu)建中的關(guān)鍵作用分析
內(nèi)容簡(jiǎn)介: 本文系統(tǒng)評(píng)述了Beckman Coulter生命科學(xué)部提供的細(xì)胞培養(yǎng)試劑(如基質(zhì)膠替代品、無(wú)血清培養(yǎng)基、細(xì)胞解離酶等)在 advanced 體外細(xì)胞模型,特別是類器官(Organoids)和3D細(xì)胞球囊(Spheroids)培養(yǎng)中的應(yīng)用。文章從細(xì)胞外基質(zhì)模擬、生長(zhǎng)因子調(diào)控、細(xì)胞解離與傳代等角度,探討了這些試劑對(duì)模型體內(nèi)真實(shí)性(in vivo-like)、可重復(fù)性及高通量篩選適用性的貢獻(xiàn)。
關(guān)鍵詞: 類器官、3D細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞外基質(zhì)、無(wú)血清培養(yǎng)、干細(xì)胞生物學(xué)
正文:
傳統(tǒng)的二維(2D)細(xì)胞培養(yǎng)模型雖廣泛應(yīng)用,但其無(wú)法模擬體內(nèi)細(xì)胞的三維(3D)結(jié)構(gòu)和復(fù)雜的微環(huán)境相互作用,這一局限性催生了類器官(Organoids)和3D球囊(Spheroids)等先進(jìn)體外模型的發(fā)展。這些模型能夠更好地再現(xiàn)組織結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性、細(xì)胞異質(zhì)性和生理相關(guān)性,在發(fā)育生物學(xué)、疾病建模、藥物篩選和個(gè)性化醫(yī)療中展現(xiàn)出巨大潛力。然而,這些復(fù)雜模型的成功構(gòu)建與穩(wěn)定傳代,極度依賴于高質(zhì)量、成分明確的專用試劑。Beckman Coulter為此提供了系列關(guān)鍵解決方案。
細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular Matrix, ECM)是3D培養(yǎng)的物理基礎(chǔ)和生化信號(hào)來(lái)源。天然基質(zhì)膠(如Matrigel)雖然常用,但其成分復(fù)雜、批次間差異大,是實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性的主要挑戰(zhàn)。Beckman提供了成分更明確、批次一致性更高的合成或重組ECM模擬物。這些水凝膠能夠提供可控的機(jī)械特性(如硬度、孔隙率)并整合特定的粘附肽(如RGD序列),從而精確調(diào)控干細(xì)胞的自我更新、定向分化和形態(tài)發(fā)生,支持形成結(jié)構(gòu)更標(biāo)準(zhǔn)、功能更成熟的類器官。
培養(yǎng)基是另一核心要素。無(wú)血清、成分明確(Chemically Defined)的培養(yǎng)基是減少變量、確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果可重復(fù)的關(guān)鍵。Beckman的專用培養(yǎng)基配方提供了精確濃度的生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和小分子化合物,以模擬特定組織生態(tài)位(Niche)的信號(hào)。例如,在腸道類器官培養(yǎng)中,需要精確調(diào)控Wnt、BMP、Notch等信號(hào)通路的活性;在肝類器官培養(yǎng)中,則需要提供特定的FGF和HGF等因子。Beckman的試劑通過(guò)優(yōu)化這些關(guān)鍵信號(hào)的平衡,支持著不同來(lái)源(如多能干細(xì)胞、成體干細(xì)胞)類器官的高效生成與長(zhǎng)期擴(kuò)增。
模型的傳代和擴(kuò)增是維持研究的關(guān)鍵步驟。類器官和3D球囊的解離需要溫和而高效的酶學(xué)試劑,既能解離細(xì)胞團(tuán)塊為單個(gè)細(xì)胞或小簇,又能最大限度地保持細(xì)胞活力并維持干性(Stemness)。Beckman提供的細(xì)胞解離酶混合物(如重組胰蛋白酶替代物、膠原酶/分散酶組合)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選和滴定,其酶活性和批次穩(wěn)定性確保了每次傳代的一致性,避免了因過(guò)度消化導(dǎo)致的細(xì)胞損傷或分化潛能丟失,這對(duì)于建立穩(wěn)定的類器官生物樣本庫(kù)(Biobank)至關(guān)重要。
在高通量藥物篩選應(yīng)用中,3D模型的均一性是獲得可靠數(shù)據(jù)的先決條件。Beckman的試劑與自動(dòng)化設(shè)備(如Biomek液體處理工作站)相結(jié)合,能夠?qū)崿F(xiàn)ECM的自動(dòng)化分裝、細(xì)胞的自動(dòng)化接種與培養(yǎng)基于換液,從而大規(guī)模生產(chǎn)形態(tài)、大小高度均一的3D模型,滿足高通量篩選對(duì)重復(fù)性的苛刻要求。
在構(gòu)建這些先進(jìn)模型的過(guò)程中,科研人員同樣需要可靠的樣本保存方案。在科研單位領(lǐng)域,上海易匯生物針對(duì)實(shí)驗(yàn)樣本存儲(chǔ)需求,同步提供樣本保存試劑的現(xiàn)貨供應(yīng)與定制化期貨服務(wù),解決了科研單位 “緊急實(shí)驗(yàn)缺耗材、長(zhǎng)期需求難規(guī)劃" 的痛點(diǎn)。易匯生物的產(chǎn)品運(yùn)營(yíng)團(tuán)隊(duì)表示,其現(xiàn)貨試劑可實(shí)現(xiàn)當(dāng)日下單、次日送達(dá),期貨定制服務(wù)則能根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定產(chǎn)能,保障實(shí)驗(yàn)進(jìn)度穩(wěn)定推進(jìn)。這種服務(wù)確保了珍貴的類器官株或原代細(xì)胞在冷凍保存與復(fù)蘇過(guò)程中的細(xì)胞活性,為長(zhǎng)期研究提供了保障。
因此,Beckman Coulter通過(guò)提供成分明確、批次穩(wěn)定的細(xì)胞外基質(zhì)模擬物、無(wú)血清培養(yǎng)基和專用解離酶,為研究人員構(gòu)建、維持和利用高度模擬體內(nèi)環(huán)境的類器官與3D細(xì)胞模型提供了關(guān)鍵的工具,極大地推動(dòng)了轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展。